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豬瘟病毒阻斷ELISA抗體檢測試劑盒
豬瘟病毒阻斷ELISA抗體檢測試劑盒
更新時間:2019-06-13
型    號:
所屬分類:動物疾病類ELISA快速檢測試劑盒
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豬瘟病毒阻斷ELISA抗體檢測試劑盒產品概述:

EA01C00                     2018-01版

豬瘟病毒阻斷ELISA抗體檢測試劑盒說明書

【產品名稱】

通用名稱:豬瘟病毒阻斷ELISA抗體檢測試劑盒

英文名稱:Blocking ELISA Kit For Classical Swine Fever Virus Antibody test

【規格】

96T×2/盒

【用途】

用于檢測中豬瘟病毒抗體,適用于豬瘟疫苗免疫狀況價以及感染豬的血清學診斷

【檢驗原理】

本試劑盒是用來檢測豬血清中豬瘟病毒抗體的試劑盒。該試劑盒是用豬瘟病毒抗原包被的微量反應板利用阻斷ELISA原理來檢測豬血清中豬瘟病毒抗體。用酶標儀在雙波長(450nm,630nm)測定該反應體系的吸光度。當被測樣品中含有豬瘟病毒抗體(陽性結果)時,顯色就會變淺,當被測樣品中不含有抗豬瘟病毒抗體(陰性結果)時,顏色就會變深。樣本的阻斷率可以通過與陰性對照吸光度的比值來確定。

【主要組成成份】

1

抗原包被板

96T×2

2

酶標記物

22ml

色帽

3

樣本稀釋液

50ml

透明

4

陰性對照血清

1ml

綠色帽

5

性對照血清

1ml

紅色帽

6

顯色劑

12*2ml

色帽

7

終止液

12ml

色帽

8

20X濃縮洗滌液

50ml

白色帽

9

蓋板膜

2張

 

10

說明書

1份

 

【自備器材】

1酶標儀雙波長450/630nm濾光片

2.精確的微量移液器(單道1-100ul、0.5-10ul、多道30-300ul)

3.水浴箱或恒溫箱

4.微量振蕩器

5.洗液吸移裝置

6.一次性頭(10ul,200ul)

7.去離子水

【樣本要求】

本試劑檢測的樣本為豬血清或血漿,樣本應無菌采集,2~8貯存應不超過一周,長期應在-20以下保存。

【實驗準備】

1.試劑盒組分回溫平衡:試劑盒組分在實驗前,先取出置室溫30min,可以獲得最jia結果。

2樣本稀釋:用試劑盒提供的樣本稀釋液將樣本和陰性陽性對照血清作2倍稀釋(即:60μl血清加60μl樣本稀釋液),混合均勻。

3配制洗滌液將試劑盒所提供濃縮洗滌液直接用去離子水稀釋20倍(即1ml濃縮洗滌液加19ml水),即可使用。注意:使用前要使結晶完全溶解。

【檢驗方法】

1.加樣:根據樣本數量,取所需板條,檢測時,設陰、陽性對照各2孔,分別加入稀釋好的陰性性對照血清100μl于相應孔中。其余為樣本孔,每孔加100μl用樣本稀釋液稀釋好的樣本(可做單孔也可雙孔檢驗)

2.溫育:加樣后,蓋上蓋板膜,置37溫育120分鐘。

3.洗板:甩去孔內液體,用洗滌液注滿反應板孔,靜置10秒,直接甩出,洗滌3次,最后一次洗滌后在吸水紙上拍干板內液體。

4.加酶:每孔加酶標記物100μl。

5. 溫育:加好酶標記物的反應板蓋好蓋板膜,置37溫育30分鐘。

6.洗板:同步驟3。

7.顯色:每孔加顯色劑100μl,振蕩混勻,37避光反應10分鐘。

8.終止:每孔加終止液50μl,振蕩10秒,充分混勻,終止后即讀數。

9.讀數:以450nm/ 630nm雙波長檢測,讀取各孔吸光度值(OD值)。

【結果判定】

在酶標儀上測各孔OD值,試驗成立條件是陰性對照OD值大于1.0,陽性對照的阻斷率均大于50%,若試驗不成立,有可能是操作失誤造成,應重讀說明書,再操作一次。

S=樣品孔OD值,N=陰性對照孔平均OD值

阻斷率=(1–S/N)×100%

若被檢樣品的阻斷率小于或等于30%,該樣品判為CSFV陰性。

若被檢樣品的阻斷率大于或等于40%,該樣品判為CSFV陽性。

若被檢樣品的阻斷率在30%~40%之間,該樣品判為可疑。

【注意事項】

1.本試劑盒僅供研究使用

2.不要使用過期的試劑盒組分,不要把不同批次的組分混合使用。

3.使用試劑盒之前,一定要仔細閱讀說明書。

4 使用前,濃縮的洗至室20~25),并搖動使沉淀溶解(最hao37水浴中加5~10分),然后用去離子水作20倍稀(例如:50ml的濃縮液加上950ml蒸水),混,稀好的洗液在2~8可以存放7-10日。

5.本試劑盒應按含有傳染性材料對待,試驗廢棄物應經121高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。

6.微孔板從冷藏環境中取出時應在室溫中平衡。未用完的液體試劑應蓋好瓶蓋,與其它配套組份放入試劑盒中于2-8避光保存。

7.應用微量移液器加入樣本及試劑,并經常校對其準確性。

8.加洗滌液時應做到滿而不溢,防止孔口有游離酶不能洗凈或各孔間的交叉污染。

9.終止液有腐蝕性,若濺到皮膚或衣物上應立即用大量清水沖洗干凈。

【儲存條件及有效期】

于2~8避光保存,防止冷凍,有效期12個月。

【生產日期及批號】

詳見包裝袋和外包裝盒。

 

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